作者jf3000 (飘流记)
看板Biotech
标题Re: [求救]FITC的label方法
时间Thu Jun 12 13:30:07 2008
※ 引述《momolin1126 (阿毛)》之铭言：
: 请问板上的各位大大们
: FITC该怎麽正确地label上目标蛋白呢??
: 有什麽特定的Buffer环境吗??
: 有些paper上有说不能用含有tris的Buffer不然FITC会跟tris反应键结
: 所以我是在二次水的环境下加入FITC分子跟目标蛋白
: 然後过滤掉没label上的
: 可是将Sample跑胶结果却无萤光反应 ><"
: 过滤後的sample中明明也有萤光反应
: 跑完胶却消失了 染色後蛋白质也还在
: 有哪位大大可以指点一下吗??
: 不知道是FITC分子没有label上目标蛋白还是怎麽了....?
: 因为老师不喜欢用kit 所以是直接买FITC分子做的实验
下列是我的建议 仅供参考.
FITC的functional group是isothiocyanate,可以直接与一级铵或者硫醇基反应.
使用phosphate buffer (20mM, pH7.4)当作反应的环境可同时确保protein的稳定性
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