作者tsubasawolfy (悠久の翼)
看板Biotech
标题Re: [求救] 血球计数数细胞
时间Thu Jun 12 11:56:45 2008
※ 引述《nutahoshi (天上的桥)》之铭言:
: 有人知道利用血球计数数细胞
: 的公式吗
: 假设我数细胞两边70颗细胞
这麽说好了...看不懂两边70颗的意思- -a
这题目感觉像老手出给新手算的 不然就是刚成立的实验室...
计数器玻片
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上下两块区域都是同样3*3个小方块组成
放大图
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数细胞的时候看每个实验是自古流传的习惯
有人会单数中间
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有的数四边後再除以四
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也有9格全数後除以九
反正就是要求出单格里面有多少细胞
举例 4格里面总共200颗
计算方法:
(200/4) X 2 X (1/10^-4)=100 X 10^4 (per mL)
↑ ↑ ↘
每格数目 Trypan blue ↓
的稀释倍数 ↓
我是等体积加 ↓
所以乘2 ↙
↙
1/10^-4(1分之10的负四次方)
每个方块长1mm 宽1mm 深0.1mm (深是指跟载玻片跟盖玻片之间的距离)
换算成体积 0.1cm X 0.1cm X 0.01cm =10^-4 mL
: 那我要分2盘24 wall 细胞数要控制在5x10 6
: 怎麽算
2盘24 well...要5X10^6 这应该是2盘24well的细胞数吧?
一个well seed 500万也太多了
等你算出你细胞到底多少後 取5X10^6总数细胞再补medium体积到你2盘24well 的总体积
例如 1well要 1mL medium 48well总共48mL
5 X 10^6 细胞数的体积算1 mL 好了
所以就取 47mL medium + 1mL细胞 放在50mL离心管摇一摇後分到24 well里
不过建议是算49 or 50well的量 至於为何..等你做了就知道
(从条件看起来应该是算50 well 每个well 10^5颗)
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◆ From: 163.15.174.166
1F:推 nutahoshi:我懂了!!!清楚明了耶!!!我的细胞挺小的 又易挂. 06/13 11:04
2F:→ nutahoshi:所以细胞数我重多一点. 06/13 11:04
3F:推 pppeko:推一下,好用心的说明跟图 06/13 21:08
5F:→ aunbis:cellcounting.html 好东西 推荐~~ 06/14 16:30