作者der19 (褪色的爱情)
看板Biotech
标题[求救] E. coli BL21(DE3)pLysS Overexpression
时间Fri Jun 6 17:12:01 2008
请问有人有做过BL21(DE3)pLysS 的大量表现吗?
目前因为我的蛋白质在BL21(DE3)表现会形成inclusion body
所以换成BL21(DE3)pLysS结果会由insoluble form 变成 soluble form
可是表现量大大降低
induction的condition如下:
500ml 菌量
37度C incubation到 O.D = 0.6-0.8
然後加IPTG 最後浓度1mM
接着
20度C/25度C incubation 16-18 hr
结果用 Ni-column 纯化出来都只有 1-2 ml/mg 量太少了
请问有人可以改善这个问题吗
因为我的蛋白质是要拿来结晶的
▁
--
※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 140.114.98.111
1F：推 alaric:考虑放大养菌量. 06/06 19:02
2F：推 wensing:你的质体是那个？ 做培养与诱导的最佳化 06/07 03:41
3F：→ der19:pET28a 06/07 23:24
4F：推 ROKEE:改host就可以收到soluble该偷笑了XDD 06/11 21:48