作者momolin1126 (阿毛)
看板Biotech
标题[求救]FITC的label方法
时间Tue Jun 3 16:52:12 2008
请问板上的各位大大们
FITC该怎麽正确地label上目标蛋白呢??
有什麽特定的Buffer环境吗??
有些paper上有说不能用含有tris的Buffer不然FITC会跟tris反应键结
所以我是在二次水的环境下加入FITC分子跟目标蛋白
然後过滤掉没label上的
可是将Sample跑胶结果却无萤光反应 ><"
过滤後的sample中明明也有萤光反应
跑完胶却消失了 染色後蛋白质也还在
有哪位大大可以指点一下吗??
不知道是FITC分子没有label上目标蛋白还是怎麽了....?
因为老师不喜欢用kit 所以是直接买FITC分子做的实验
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◆ From: 140.130.189.49
1F：推 turtle24:FITC上有离去基吗? 目标蛋白有可以被攻击的地方吗? 06/03 18:44
2F：→ turtle24:细部我都忘了..两年前有看过学长label FITC.... 06/03 18:45
3F：推 runpapa0520:染蛋白不知 染菌的话要先用ACETONE 溶解，泡在PH 9 06/03 22:40
4F：→ runpapa0520:的0.1 M NaHCO3 染1h，之後再洗掉。 06/03 22:40
5F：→ qumai:我用水可以耶@@" 虽然没纯化 用质谱看是有加上去 06/03 23:13
6F：推 damnedest:FITC要在硷性环境下作用 06/04 20:54
7F：→ momolin1126:谢谢大家的回答 我用各位说的Buffer环境试试看 06/06 22:00
8F：推 menadione123:买FITC-NHS ester与NH2直接反应 06/14 01:51