作者crazyrange (热血羽球)
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标题[求救] RT-PCR实验设计一问
时间Mon Jun 2 09:24:30 2008
想请问一下
关於作RT-PCR时的实验设计
目前我的实验需要看到四个基因
一个GAPDH 另外三个target gene
因为是做到2重复
加上检体多达60个
而我跑一次RT-PCR最多只能跑96WELL
所以想请问一下
在进行RT-PCR的时候
以下两种方式那个比较好
1.四个基因分开测（不同病人）：
也就是说我一次只看一个基因，最後再按照检体来源将各结果放在一起计算。
好处是一次测一个基因避免操作上的失误，但是因为同个检体来源是在不同次
实验中测量不同基因，会不会被争论有误差。实验都是用相同的cDNA。
2.一次测四个基因（同个病人）：
也就是说我以检体来源最为依据，一个检体同时测量四个基因，这样可以同
时获得单一检体的所有数据。
当初想说，因为1＆2在加入cDNA时，因为cDNA是同一批，所以是1还是2的作法，
在加入cDNA时多少都会有pippeting error所以就想说1＆2没差。
只是如果选择1的作法，在换新的cDNA时，所有的基因都要重跑一次，
因此想问问各位有经验的大大，对於一次要看多个基因，要如何设计实验比较好？
感谢
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◆ From: 59.120.7.114
1F：→ sisyphus:一组四个慢慢跑 这样比较好一点 06/04 20:58