作者apoptosis (good job)
看板Biotech
标题[求救] real time PCR variation 很大(同sample)
时间Wed Mar 19 12:14:09 2008
最近作real time遇到困难
我的问题是这样
1.primer + mixture 也有大约20~30 cycle, 我怀疑污染 就去跑胶
run gel发现有加cDNA的有两条BAND,
一条在100bp 是我的产物 另一条在约50bp 我怀疑是primer dimer.
如果不加cDNA 就没有100bp那条 只有50bp
现在不知道要怎办 只能redesign primer吗?
如下图
M cDNA+primer primer only
一
一
一
一
一
一 一
一 一
2.我的variation非常大 大概会有3~5个cycle(同一个sample)
不知道是不是就是primer dimer造成的.
现在一头雾水 请教大家 谢谢
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 76.182.57.0
※ 编辑: apoptosis 来自: 76.182.57.0 (03/19 12:14)
1F：推 meiosisLin:primer序列可否PO 一下 03/19 12:44
2F：推 xcvbnm:primer dimer应该是一团雾雾的吧@@~~你50bp的band很清楚? 03/19 13:35
3F：推 zoom8080:melting curve如何? 03/19 13:41
4F：推 qqo8855436:PRIMER浓度降低试看看 03/19 18:13
5F：→ qqo8855436:亮外...是哪一家的机型呢?? 03/19 18:14