Hi, 有些白菌落可能是 false positive 的, 建议你把菌板在室温或冰箱多放 几个小时, 那些 false positive 的可能会再转蓝. 这时再去挑那些始终 都是白的菌落, 可能机率会大些. 一般来说, 大片段相对会比较难 clone 一点, 多挑几个 colony 吧. Good luck! ※ 引述《kvw (Je t'aime)》之铭言： : 最近在做cloning : 所要insert进去的片段大概是1700 bp : 所使用的是p-GEMT easy vector : 前面都很顺利 : 後来挑了white colony : 抽plasmid後 用PCR做confirm(老板说这样比较省钱) : 结果出来 完全没有insert : 初步排除是X-Gal出问题 : 因为有蓝有白还蛮多的 : 而其他inser进去的片段是400 bp的都成功 : 唯独这个大片段的 挑了快20个white colony都没有insert进去 : 有没有人遇到这样的情形 拜托帮帮忙 --

※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc) ◆ From: 68.197.145.28