作者lothc (真的是太吸引人了)
看板Biotech
标题[求救] 有关上flow前的酒精固定
时间Tue Mar 11 23:45:17 2008
大家好
我想请问一下有在做flow的版友们
当用70%酒精固定cell时
是不是很不容易把cell均质呢??
我目前的做法是在细胞wash後离心取pellet时
留下约200~250ul的PBS不吸光
接着votex把pellet均质後
再加入95%酒精700ul
这样子final刚好是70%
同时cell也比较容易均质
不过还是多多少少会看到一些没有打散掉的pellet ~"~
请问一下这个状况是正常的吗??
以及我的这个固定的手法合不合理呢??
谢谢各位
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 192.192.90.33
1F：推 tsubasawolfy:之後去除酒精还是要离心变pellet... 03/12 08:03
2F：推 tsubasawolfy:忘了说 我是完全抽乾後再加入PBS 然後pipetting稍 03/12 08:06
3F：→ tsubasawolfy:微冲散 再把EtOH一小滴一小滴慢慢低入後在用pipette 03/12 08:09
4F：→ tsubasawolfy:混合均匀 没有残留pellet的问题- -a 细胞数大概80万 03/12 08:10
5F：→ tsubasawolfy:(反正跑flow细胞不用太多 太多没打散还会黏管) 03/12 08:11
6F：推 scs0214:我的作法也是跟原PO类似 我认为这样的效果比较好 而且加酒 03/12 10:00
7F：→ scs0214:必须同时缓慢的vortex sample tube 03/12 10:02
8F：→ lothc:了解了 我会再加入酒精的时候同时vortex 谢谢楼上两位喔^^ 03/12 12:16