根据 Amersham 官方 2-D Electrophoresis Handbook 上的说法: (免费的 PDF 档,建议您去下载 http://tinyurl.com/37cvtl) 各种长度的 strip holder 的 loading sample 量如下 (p.59) 7cm-125uL;11cm-200uL;13cm-250uL;18cm-340uL;24cm-450uL loading sample 後还要加入"适量的" Cover Fluid, 以防止 sample 乾掉与 urea 结晶析出, 至於适量是多少? Handbook 仅很笼统的说 (p.61) "adding fluid until the entire gel is covered" 也就是盖过 strip 就好, 实务上,我们 7cm holder 加 0.4~0.5mL 您遇到的"sample 似乎会漏超出电极外"的问题, 主要应该是因为盖上 holder 的盖子後,Cover Fluid 因毛细现象渗出, 其主成分为矿物油,会浮於 sample 上, 因此您担心的"loading的量不准"应该不至於. 不过如果漏的太严重, 轻者因无法达设定的电压而严重影响焦集效果, 中者於会在黄金面板留下清不掉的焦痕, 重者很可能会短路而使电路板烧毁... 预防方法: 1.7cm holder 加 Cover Fluid 不要超过 0.5mL 2.操作要保持 holder 水平, 溢出 Cover Fluid 要尽量擦掉 3.若贵单位是 Ettan IPGphor III, holder 可以试着不要加盖子 4.以长久使用的 holder,请送检修,我们曾发现会从电极漏的... (官方说法 holder 应该很耐用... "Strip Holders may be baked, boiled, or autoclaved. DO NOT EXPOSE THEM TO STRONG ACIDS OR BASES,INCLUDING ALKALINE DETERGENTS."(p.60), 正常使用照理说不应该如此,如果发现与我们一样的请自行与代理商反应...) ※ 引述《slash7788 (800公里的，答案)》之铭言： : 最近在跑amersham 7cm strip : 用的机器是 Ettan IPGpghor Holder : 方法是将sample 250ul 直接loading在holder上 : 然候设低电压直接rehydration : 感觉遇到的问题是 sample似乎会漏超出电极外 : 这样不就代表说 我loading的量不准了 : 大家遇到这种问题是怎麽解决的??? : 另外 看strip上面的介绍是 当load大量的时候 会放paper在电极上 : 不过 看上面的介绍 好像是把paper 固定在电极的一端 : 这样的话 是让paper 只挡一端吗(那另一端不就也会照漏了) : 之前我用bio-rad 的系统 是两端都会上滤纸片 滤纸片会有bridge的功能 : 但是现在amersham的机器让我觉得一整个囧阿 : 有在跑amersham的可以帮忙回答一下吗 感恩 -- TechComm 是台大生科院 科技共同空间 的简称， 对校内单位提供生物科学相关实体技术与虚拟谘询之整合服务， 目前建制 基因体 蛋白质体 抗体 生物影像 贵仪 等五大平台, 各服务已陆续开动,欢迎您的加入与指正! http://techcomm.lifescience.ntu.edu.tw/ --

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