作者boyo (29大头)
看板Biotech
标题Re: [求救] Cell seeding怎麽样都不均匀.....
时间Sat Jan 26 23:05:12 2008
※ 引述《compaq (不是你)》之铭言:
: ※ 引述《wadewang (小龟)》之铭言:
: : 已经种到快发疯了 看了之前的讨论也没有头绪
: : 现在的情况是种10cm dish和75T flask都没问题
: : 问题都出在3.5cm dish和 24well plate
: : seeding的方法是
: : 3.5cm dish是先加入适量medium 然後将细胞液均匀滴在dish上 总体积约1ml
: : 然後十字摇法,前後3次左右3次,重复3次 摇晃时间差约为1秒
: : 24well plate则是将细胞稀释到500ul的体积 然後均匀滴进去
: : 然後一样十字摇法,前後3次左右3次,重复3次 摇晃时间差约为1秒
: : 下场就是细胞都聚在周围
: : 中间细胞都很少
3.5的话 我是前後十次完了停下等液面停下再左右十次 两个cycle
24well跟96well不用摇.........
你打的够散 细胞自己会爬到旁边 越摇越糟糕
: 我将细胞seeding在96 well的时候
: 也有遇过这样的问题
: 那时候解决的方法是seeding完细胞之後放在室温下约1hr
: (这个方法是我同学看到别人的protocol後告诉我的)
: 之後我seeding完细胞都会放在操作台上1hr之後再放到incubator
: 你可以试试看seeding完之後放在室温一下
: 但不建议像96 well一样放一个小时
: 因为细胞反而会聚集在中间
: 希望对你有帮助
: : 到底应该怎麽摇才能均匀阿
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如果孔子是那待沽的玉
我便是待斟的酒
用一生的时间 蕴酿自己的浓度
只为等待刹那的倾注
张晓风 酿酒的理由
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◆ From: 221.169.50.122
※ 编辑: boyo 来自: 221.169.50.122 (01/26 23:06)