作者transmore (小次郎)
看板Biotech
标题[求救] 关於自由基(DPPH)清除试验
时间Wed Jan 2 11:45:05 2008
小弟现在在测试重组蛋白的抗氧化力
遵照侯文琪等人於2001年发表文章的方法
先取1.2ml 的sample + 0.1ml pH7.9 Tris
再加1.2ml 80 micro Molar DPPH (in methanol)
避光、静置室温40分钟後测OD517nm
实验结果
以glutathione当标准品的实验基本上没问题
吸光值随glutathione的浓度增加而降低
但我的重组蛋白的测试却发现吸光值会随着浓度增加而增加(非线性)
可是以肉眼观察
DPPH的颜色是有减少..甚至会接近黄色
显示我的重组蛋白应该是具有DPPH清除能力
不懂的就是为什麽吸光值反而会上升?
不知道各位先进有没有遇过类似的问题?
恳请各位的帮忙
小弟已延半年了
这个实验做不出来还不知道要再延多久 T_T
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 134.208.24.96
1F：推 rrr785:说不定是甲醇浓度太高 造成蛋白变性 01/02 12:21
2F：→ rrr785:不如试试蛋白单独加甲醇如何 01/02 12:23
有测试过 但没有吸光值(只有0.001)
※ 编辑: transmore 来自: 134.208.24.96 (01/02 13:56)
3F：推 wwwcopy:放个30分钟试试看 我接触的DPPH都静置或混匀30min 01/02 14:51