※ 引述《oopa (11)》之铭言： : 最近要使用Lewis lung cancer cell打入B6小鼠(非免疫缺陷鼠)建立肿瘤模式 : 根据要看的参数,欲分别采用尾静脉注射与皮下注射方式注入细胞,观察肿瘤发生的情况 : 关於这样的模式在执行上有些问题想请教: : 1.就目前个人搜寻的文献中,皮下注射所使用的细胞量似乎都高於尾静脉注射的细胞量, : 这样的认知正确吗?还是我个人文献阅读量不够,或刚好挑选到同类文章所造成的错误 : 认知?若认知无误,可能原因为何? 我以前实验室sc打的细胞量比iv高 就我的想法 (没有论文佐证XD) 因为血液是供给养分的主要来源 打皮下的时候cancer cell需要先促使angiogenesis才能获得足够的养分 变成cancer cell 需要先建立microenviroment 在microenviroment建立前整个环境是比较不适合细胞生长的 需要较多的细胞才能有足够的残存数目 发整成完整的tumor 而不会在之前逆境中就死的差不多了 而IV直接就是让细胞离营养来源比较近 虽然血液里会其他因素会伤害 cancer cell ex.血流剪力 但是只要当cancer cell能在organ中seeding 他离营养供给的器官近 就比较容易发展 : 2.根据文献所言,打入静脉的总细胞液量从100ul-200ul不等 : (200ul是protocol建议的最大量) : 我有试过的结果,因为技术不佳,成功注入最多150ul左右,再多就推不进去了, : (应该不是打到别的地方,因为注射时其他部位没有肿胀,且在注射量达150ul前都顺畅) : 但因为该实验无法等我技术完全OK後再进行, : 因此在使用相同细胞数目下,总体积减少,势必细胞浓度会增加 : 请问细胞如果浓度较高 对於老鼠本身是否有明显影响? : 有好心人可以分享经验吗?有没有可能细胞太浓让小鼠血管栓塞? 关於肿瘤模式 前一阵子 有人有经验分享过 那位才是强者 可以爬文看一下 我老板说IV 可以看尾巴颜色 若是注射没进去的话 会造成尾巴有一段会是较淡颜色 而没有血色 与其他部分有差距 : 3.静脉注射所使用的针头需要使用几号针头才不致使细胞破裂? : (目前练习使用26G针头灭菌後的PBS) 我们是用胰岛素短针 : 以上问题还请好心的高手们分享经验与看法 : 感谢^^ --

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