吃光光.... 看到有人在讨论immunofluorescence的一些细节 我也想来问问几个我遇到的问题 因为我用的细胞是293T 原本就不会贴的很紧 用PBS就可以冲下来 我们实验室在固定细胞的时候是用100%的 Methanol 加入五分钟後吸乾并用PBS wash 两次後再打洞 这样可以让细胞固定的很牢 可是如果我的细胞已经有transfection EGFP 或是DsRED 就不能用Methanol 因为会使EGFP不亮 我试过用2% formaldehyde 固定20分钟 可是293T细胞感觉固定的并不是很好 常常wash几次後细胞就...不见了 囧 即使在seeding细胞前先用FBS把dish或是cover slide 先coding过还是一样 我也试过先用2% formaldehyde 固定20分钟後 再用100%的 Methanol固定五分钟 这样细胞会牢 可是对EGFP的亮度依然有影响... 不知道板上的各位高手们有什麽好方法吗? 可以让细胞固定的牢又不会让EGFP不亮... -- 流星，是不是因为承受了太多的孤单才会落下的 　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 　 如果是，那麽，请坠落吧 !　　　　　　　　　 ○ 　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 <■︿ 因为我的孤单，好多..好多....　　　　　　 ......〉 ︵ 。 　　 --

※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc) ◆ From: 163.25.118.143 ※ 编辑: charliehsu 来自: 163.25.118.143 (10/25 03:10)