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※ 引述《iamprada (熊宝)》之铭言: : H大您好 : 目前实验室正在进行的是肿瘤鼠的建立ˇ : 若是能够成功建立肿瘤鼠模型的话 : 将选用适当的inhibitor : 将metastasis pathway target protein 做 block : 并探讨inhibitor对於肿瘤大小及转移的抑制能力 : 只是其中注射部位 引发天数 以及测量技巧 能须重新确认 : 希望能提供您些许帮助 : 也希望有经验的大大可以提供这方面协助!! : 感谢!! 有些意见提供你参考一下罗.... 1、 In vitro assay: 利用boyden chamber来看看肝癌细胞株的invasion potential, 确立invasive ability後,分别以药物及控制组来验证 以scratch assay来看肝癌细胞株的migration potential, 确立migration ability後,分别以药物及控制组来验证 以cell viability assay来证明药物对癌细胞并不会杀死癌细胞, 而排除因细胞减少所造成invasion cell减少的false positive 的机率 (不过有些药物也可能是dual of function) 2、 In vivo assay: 建立 animal model,一般是以皮下注射或是尾静脉注射,癌细胞注射的量 一般约为1X10 6~7方,然後取时间点,牺牲老鼠,取organ固定,做HE stain 来看是否此癌细胞株有转移性。 若以你文中提到的方式,一般做法大概是用尾静脉注射,使癌细胞在肺形成 nodule (也有可能在肝,要建立model才能知道,每种细胞株都不太一定) 如果确定可行的话,再打一次老鼠,分组,给药, 有效没效大概只能看一个course会不会使老鼠的survival延长, 或者是tumor nodule减少 以上 ^^"" 3、 Clinical sample (针对研究metastasis suppressor or enhancer expression) 若是大家想研究某些基因对tumor metastasis的影响时, 一般可以藉由stable expression target gene cell line 来进行 1,2的探讨 若是meta suppressor,则 invasion abitliy or migration ability impaired 在in vivo 则可以看到 nodule 减少或是survival 延长(当然选用的细胞是以 highly invasive cell line overexpress 某 putative meta suppressor) 反之亦然,并且可以加入药物抑制某meta enhance,或利用condition expression 的方式来研究,并且在临床病人检体上探讨其表现量与其预後的关系 (以上补充一下 ^^") --



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◆ From: 59.121.115.28
1F:推 HIbaby:谢你详细的回答 10/18 11:50
※ 编辑: lentivirus 来自: 140.109.49.184 (10/18 13:33)
2F:推 iamprada:好详尽的建议~感恩!! 之前也做类似的转移实验~我会试试看 10/18 21:47
3F:推 KaurJmeb:这篇可以转到biotech的姊妹部落格和wiki吗? 10/19 19:48
4F:推 lentivirus:恩~~没问题...^^" (希望对大家有帮助...) 10/20 20:47
※ 编辑: lentivirus 来自: 59.121.119.21 (10/22 10:50)







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