以下意见是一些小心得 仅供参考^___^ ※ 引述《Aanitacat (小喵 ~)》之铭言： 1. 有很多的抗体上面会写应用在IHC而无标明可以应用在ICC上面 厂商是不建议我拿来做ICC，但是如果我还是想做ICC可以吗? 会不会染不出来? 如果你手边无法取得其他针对相同抗原且已知适合ICC的抗体 关於你提到适於应用IHC的抗体(是否有说明适合石蜡或冷冻切片的样本?) 我个人的看法是 通常ICC的抗原呈现较IHC(尤其是石蜡切片样本)单纯 建议可以一试 染不出来的机率不高 但各步骤条件仍然要下功夫去试 2. 做完ICC以後在萤光显微镜下面看，是有看到红色萤光表现(我的二抗是红色萤光) 但是居然发现negative control的细胞也出现红色萤光.....= = 天ㄚ~~~这已经不是第一次了....不知道到底是什麽地方出问题... 是二抗的问题呢?还是我的实验步骤中出了问题?有没有人对ICC非常非常了解 或是谁有相关的参考资料可以让我参考呢??感激不尽~~ 我可以想到的可能性: 1. 样本本身的自体萤光(auto-fluorescence) 这是免疫萤光染色遇到的麻烦状况之一 可以考虑用不同波长萤光的抗体呈现signal 2. 二抗造成的non-specific effect 可能是blocking条件不够好 我自己在IHC实验中是利用在blocking solution成分中加入二抗来源动物的血清 有时候会有不错效果 以上 供参考 --

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