作者HUVEC (穷)
看板Biotech
标题Re: [求救] 关於non-reducing gel
时间Wed Sep 19 21:31:51 2007
※ 引述《realm (realm)》之铭言：
: 最近要研究一个protein的oligomerization (透过disulfide bonds...这是已知的...)
: 所以想要跑non-reducing gel...
: 查过一些线上和paper...
: 感觉起来, 只要sample loading buffer不要加reducing agents (如BME或DTT) 即可,
: 所跑得胶似乎依然是一般的SDS-PAGE
: 不过跑完看到的pattern和跑一般SDS-PAGE似乎没有什麽两样...
: 所以有点疑惑, 是否应该要跑native gel...即不含SDS的胶...
: 想请问是否有人跑过non-reducing gel...
: 是否可以分享一下...先谢谢罗~~:)
加 DTT或2MB 是reduce (打开disulfide bond)
加 SDS和加热 是denature (打开二级结构)
如果你要跑non-reducing，
loading buffer以及lysis buffer 不要加 DTT 或2MB 就好了
其他跟跑一般的 reducing gel 一样
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※ 编辑: HUVEC 来自: 140.114.100.190 (09/19 21:32)