作者iiidns (大野狼)
看板Biotech
标题Re: [问题] Griess Reagent for NO assay
时间Mon Sep 17 15:34:36 2007
※ 引述《Aragora (Aragora)》之铭言:
: 测巨噬细胞加入LPS後所产生的NO.
: 1% sulfanilamide in 5% phosphoric acid
: and 0.1% naphthylethylenediamine dihydrochloride in water
: 所用的试剂.
: Sodium Nitrate做标准曲线.
: 25μM, 50μM, 75μM, 100μM, 250μM, 500μM, 750μM and 1000μM
: 将试剂与不同浓度Sodium Nitrate混合.置室温下15分钟.测吸光值546nm.
: 出来的结果完全没有变化.
: 请问此试剂应有怎样颜色上的变化?
: 还是有什麽地方我没有注意到?
颜色会因为NO的含量多寡而改变(浓度越高 颜色会越黄--印象中记得是黄色)
室温下反应10min,避光
实验室 standard所用的稀释浓度是
0, 1.5625, 3.125, 6.25, 12.5, 25, 50, 100uM
超过某一限度後 OD值会乱跳(超过griess reagent的上限)
这种事情我做过(还拼命的重复做了三次 後来才发现是一开始稀释浓度太高)
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◆ From: 163.15.163.64