作者littlebu (LittleBU)
看板Biotech
标题[问题] 请问自制Gradient SDS PAGE的可行性与方法？
时间Mon Sep 3 12:37:19 2007
各位先进
看paper的时候会看到别人使用NuPAGE的4-12% PAGE
想请问如果我也有类似的需求
那该如何自制类似的gel?
假如我想要的梯度是15%-8%
那我应该等15%的Gel凝了之後再加8%下去凝？
还是15%和8%各加完APS、TEMED後混在一起下去凝？
另外还有一个问题
如果loading两种protein marker
结果marker1和marker2同样分子量的band
出现在不同高度上 这样是要相信谁 囧...
先谢谢各位的指教了
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 163.15.175.107
2F：推 littlebu:谢谢您，可是没有＄＄，才会想要问有没有别的方法 09/03 14:20
3F：推 stemcell:一定要用蠕动pump吧....手工能作gradient 算是达人了 09/03 15:11
4F：推 littlebu:那请问可以做两种％的吗？ 谢谢 09/03 15:41
5F：推 stemcell:你要不要先说你的目的..也没有不行做两种％ 只是很少见 09/03 16:38
6F：推 littlebu:再次谢谢您的回应 我要的目标在21kda和160kda 09/03 18:11
7F：→ littlebu:但是用11%的gel 130和170的marker相隔很近 09/03 18:12
8F：→ littlebu:所以想请问是否能用不同浓度来分比较开一点 Orz 09/03 18:13
9F：推 missoul:作过 用针筒加针头稳定流进去 有效果 09/03 19:30
10F：→ missoul:而且做法是 在微量离心管上配好各种梯度浓度 先放流浓液 09/03 19:31
11F：→ missoul:配法是做比例式地混合两浓度的胶液 09/03 19:32
12F：推 KittyGod:针筒可行+1 09/03 21:48
13F：推 littlebu:请问您 例如8～15％ 是将两种浓度都配好 APS也加完 09/04 01:21
14F：→ littlebu:之後再将两种浓度以不同比例配在微量离心管？ 09/04 01:22
15F：→ littlebu:然後用针筒将每一小管依次缓慢注入玻璃内吗？ 09/04 01:22
16F：推 littlebu:还有这样的话每一个比例大约要加多少量呢？谢谢 09/04 01:26