作者aggaci (下棋吧 five chess)
看板Biotech
标题Re: [问题] 确认细胞上的receptor?
时间Tue Aug 28 00:03:10 2007
※ 引述《realism ()》之铭言:
: 我想确认某个细胞上是否真的有特定的receptor 不知道有哪些方式?
: 目前自己想到的是
: 1. QPCR去抓 (但是否会比较不准 因为不是直接去认cell表面?)
: 2. flow cytometry 去抓surface marker (不过我没做过 是不是
: 要去找有没有我要的protein的commercial的抗体? )
: 初学者的疑问 谢谢大家帮忙 >.<
真的要做却又不想花钱买专一的抗体
可以试试这个方法
把这个基因的ORF接在mammalian cell expression vector上
尾端接一个tag,如HA tag、6H、c-myc、flag-tag
送进细胞表现
把细胞膜收下来,直接用tag的抗体去做western blot
(前提是必须表现的出来)
运气够好,抗体认的到你接的tag(native form)
直接用tag antibody去做flow or confocal
这个方法我想不需花很多钱,却又能达到你目的
但比较费功夫!
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◆ From: 140.114.100.165
※ 编辑: aggaci 来自: 140.114.100.165 (08/28 00:19)
1F:推 tsubasawolfy:没商业化的也只能自己做Orz 08/28 01:12
2F:→ tsubasawolfy:不过这就牵扯到运气性质的分生了... 08/28 01:13
3F:推 Highwind:应该先向原发现的lab要要看吧 08/28 07:07
4F:推 realism:OKOK 08/28 14:02