作者humwang (gogowang)
看板Biotech
标题Re: [问题] Roche的protease及phosphatase inhibit …
时间Thu Aug 23 21:14:31 2007
※ 引述《Chelsea911 (England victory)》之铭言:
: 请问板上大大有用过Roche的这两个产品吗?
: 效果如何呢?
: 里面的datasheet只有提到一颗锭剂可以泡成10ml lysis buffer
: 顶多提到如果protease或phosphatase很强的话可以只配成7ml来使用
: 却无提到这样子的一个浓度可以抑制多少细胞的 phosphatase 或 protease
: 有大大有经验可以分享吗??
: 另外它的卖点可以在medium中加入...
: 就针对这点而言~这些inhibitor真的能进入胞内吗???
我之前用过
它的protease inhibitor真的好用
我是过用它来处理细胞, 然後lyse掉细胞
跑western blot
这个protease inhibitor是可以block protein degradation
(我那时做的是focal adhesion complex proteolysis)
也就是说, 虽然它是水溶性的
但是因为分子比较小或是其他因素, 它是进得了细胞内的
虽然在压成锭剂时加了不少固化剂
但是在处理细胞时, 我若没记错, 500ug/ml就已经能抑制掉部分的degradation
1 mg/ml基本上是抑制掉几乎80%以上的protein degradation
我忘了它的锭剂一颗大概多重, 不过当时买一瓶後用了蛮久的
所以是可以再further dilute
phosphatase inhibitor我没用过, 不晓得它的效能如何
也许其他的网友能分享一下
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