作者harvey (车轮蛋糕:))
看板Biotech
标题Re: [求救] 融合瘤污染?
时间Wed Aug 22 23:56:51 2007
※ 引述《bb89233 (life)》之铭言:
: ※ 引述《bibiman (大学读六年><)》之铭言:
: : 我在细胞融合之後以加HAT的RPMI养了几天
: : 前两天换加HT的RPMI+30%FCS的培养液
: : 今天镜下发现培养液里有类似线状的原虫在里面游泳 = =
: : 应该是培养液本身有污染,请问有得救吗?
: 其实..是血清..建议你使用gold等级或是hybridoma专用的血清
是用多少倍数的显微镜看呢?
会游泳也可能是细菌污染
如果是细菌污染 我记得似乎有类似以gentamycin加PBS稀释後处理几个小时的解法@@
要网路上搜寻可靠的网页看看 不过如果你的细胞状况不甚健康...囧 可能很难救喔
: : 还是说有人有经验吗?
: : 免疫小鼠要花了我几个月的时间啊~
: : 还有请问一下,胎牛血清非动化是把整瓶500 mL的血清在50~60度C水浴30分钟,
: : 然後就整瓶冷藏?
: : 还是平常以-20度C冷冻,看需要多少时才取多少mL出来水浴?
: 一般来说..新的血清非冻化..我都会把它放在4度c的冰箱给它overnight
: 到了隔天就会还有一点小碎冰..然後再放置水浴槽56度c 2hr 就可以罗
: 接着就分装到50ml的tube 就可以冰起来罗
我们实验室习惯是在37度C水浴槽解冻 待整瓶FBS完全解冻後於56度C水浴槽加热30分钟
再以灭过菌的血清瓶收集过filter後的FBS,才进行分装到50CC管
分装後冻於-20冰箱 需要用时再取出解冻
: : 因为没有细胞培养的经验,又没有人可以带,都是自己一个人瞎摸索
: : 感谢
: 建议还是有经验的人带
: 参考一下罗
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 140.116.143.219
1F:推 oopa:过filter,FBS中某些营养是否会被滤掉呢?曾听过这说法,很好奇? 08/23 18:43
2F:推 berros:会 但要看分子量大小和filter孔径 08/25 21:35