作者boyo (29大头)
看板Biotech
标题Re: [问题] NORTHERN一直做不出来
时间Sun Aug 19 01:13:54 2007
※ 引述《kirby0415 ()》之铭言:
: 想请问板上有做过NORTHERN的各位
: 我实验室的NORTHERN不是用kit做的
: 而是自己配northern所需的buffer
: 但是最後ECL呈色出来 RNA的地方都反白
: 但我positive control(是DNA)都一直有做出来
: 我当初是以为可能再transfer过程 RNA就degrade了
: 所以去做了dot blot
: 但结果仍然一样
: 那我又想说也许是我要测的那个RNA 在细胞里的量太少所以看不到
: 所以我又另外制备了actin probe
: 想说actin在细胞里的量很多 看可不可以再跟probe hybridization到
这个逻辑是对的 可是你要先检查你设计出来跟做好的的probe是否可以用
方法是先制备一些test用的membrane 然後跑test probe
确定可以用再接下去其他的实验
: 但是结果一样 就是RNA又反白
: 我们的probe是用biotin-avidin的方式侦测的
: 所以想请教有经验的各位
: 我的northern到底是哪里出了问题?
: 谢谢罗!
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When you have eliminated the impossible,
whatever remains,
however improbable,
must be the truth.
" 四签名 " 科南道尔
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◆ From: 211.74.121.81
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6F:推 kirby0415:嗯 谢谢你的建议~ 08/20 12:21