作者jenurfor (整天吃饱没事干)
看板Biotech
标题[求救] 我用adenovirus 做的 recombinant protein size 变大了！@@
时间Sat Aug 18 23:07:26 2007
最近遇到一个大问题，
就是我使用了 Invitrogen 出的 adenovirus kit，
置备我的基因，同时也置备了EGFP 当作control
当病毒都做好了之後，我把病毒拿去感染 NMuMG cell，
然後想要比较感染後不同天数，表现量有无差异，
所以就把不同感染天数的细胞用 RIPA抽蛋白质，
用EGFP的抗体跟我的基因的抗体去hybridize，
结果，神奇的事发生了～
EGFP 的大小从 27kDa 变成55kDa
我的基因也从 37 kDa变成 60~70 KDa，
我後来有用 plasmid transfection的NMuMG 细胞蛋白质做对照，
发现，用plasmid transfection 的蛋白质大小正常，
请问，这是正常的吗？？
基本上，我的基因是会外泌的，但是我很怕如果是virus genome造成的话，
会不会造成无法外泌或是失去其protease 的活性？
谢谢各位大大，请帮帮我～><
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1F：→ jenurfor:忘了说，我使用的载体是 pAd/CMV/V5-DEST 08/18 23:07