作者buterscotch (##)
看板Biotech
标题Re: [问题] 关於promoter的选殖
时间Fri Aug 17 17:28:36 2007
我不太懂你clone promoter的方法
可以给我一个link看你的protocol吗
from my understanding,
you should not see bands in the first PCR with genome walking...
but maybe my protocol is different from yours
※ 引述《kpp (...)》之铭言：
: 目前采用genome walking方法，来选殖基因的promoter
: 实验拖延了半年以上 还是没结果
: (曾经出现第一次PCR有条带，但做nested PCR反而smear >"<)
: 已经分别设计2组引子对去实验 PCR结果依然smear
: 我设计preimer的Tm值大概都是64~65度左右
: (protocol是写建议67度以上，但我找不到合适的区域)
: Taq用过Kit的 也曾试过Ex-taq 跟LA-taq 但成效都不佳 (需配合buffer吗??)
: 救命阿 现在不管怎麽跑PCR 都没出现条带了 ~"~
: 请问可能是哪里出错? 或是该怎麽改进
: 另问大家 PCR升降温设定条件为何? 谢"
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