作者aken740127 (阿垒)
看板Biotech
标题[问题] kupffer cell primary culture
时间Wed Aug 15 18:18:36 2007
请问有人做过kupffer cell primary culture吗?
我参照其它paper的protocol分离下来的细胞量并不理想
我的方法是先将大鼠肝脏以生理食盐水灌流去除红血球
接着再将肝脏取下来以 PBS + collagenase IV游离细胞
(也有其他paper是将collagenase IV灌入肝脏分解 何种较好?)
将游离的细胞离心去除其他组织碎屑後
放入percoll分离细胞(想请问有人熟悉用法吗?)
最後分离下来的细胞也没有很明显的分层
想请问是否是离心的转速及时间太短(400g 20min)
如果有人做过kupffer cell primary culture
可以传授一下经验吗?
谢谢~
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 163.15.174.136
2F：→ runpapa0520:细胞悬浮液要非常缓慢延管壁加到percoll上 分层才会好 08/15 22:44
3F：→ runpapa0520:根据这篇 分到10*7的细胞 不是问题 08/15 22:47
4F：推 aken740127:谢谢大大 可是我没有办法下载这一篇... 08/17 10:14
6F：推 runpapa0520:已寄 08/18 10:07
7F：推 aken740127:感激不尽!! 08/19 02:15