嗯 对~gel是用formamide做的 我EtBr是等到transfer完,把压的扁扁的胶拿去外染 是有看到一些尚未transfer过去的sample 但应该占当初loading sample的极少量 而我拿membrane去UV box 以254nm的UV去crosslink 5分钟 从box上方的玻璃可看进去我的membrane 是可以看到membrane上有黑黑的 所以想再请问一下 这样是否就是我的sample有上去呢? 谢谢罗! ※ 引述《leftt (left)》之铭言： : 我以前用过molecular cloning的古典法做过 : 你用哪种gel跑? formamide吗? : 跑电泳的时候有加上一点点EtBr吧 : 一个偷吃步 : transfer完偷偷在紫外灯上看一下就知道膜上有没有东西了 : 不然唷 照一下你transfer後扁扁的gel渣 : 看看有没有很多残留 也可以知道 : Southern也可以用这招测试 : 如果为谨慎连EtBr都没加的 : 可以把gel渣在拿去外染EtBr也可以知道 : 因为这样就可以看出来 : 所以我从来没有染过膜 後面的问题就无从回答起了 : ※ 引述《kirby0415 ()》之铭言： : : 因为我们实验室做northern并不是用kit去做 : : 而是用自己配的buffer 还有实验方法 : : 我现在遇到了一个问题 : : 就是我想去看我transfer以及crosslink後 : : RNA到底有没有确实crosslink到nylon membrane上 : : 在网路上有查了资料 : : 好像可以用methylene blue去染membrane : : 这样可以知道membrane上是否有RNA : : 想请问有做过这样染色的人 : : 此方式是否真的可行? : : 那....crystal violet可以取代methylene blue吗? : : 因为这两个染剂 其实大多都是在染细胞细菌的吧? : : 用在northern的这个检验步骤 好像蛮少人试过的 : : 请知道的版友可以解惑一下罗 谢谢~ --

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