作者Koilocytosis (Koilocytosis)
看板Biotech
标题[问题] DNA ladder实验
时间Thu Aug 9 18:34:11 2007
实验方法
3x10^6个细胞以200uM, 500uM, 1mM H2O2处理六小时
(paper上说可诱发凋亡, 也可见到DNA ladder)
用TRI reagent抽DNA (方法:
http://www.mrcgene.com/tri.htm).
最後加入20uL水将DNA回溶,
但因前一步骤的酒精没有挥发的很完全, 所以总溶液体积约为40-60uL
取一半(30uL)样品, 加上dye混合之後就跑1.2%琼脂电泳
实验结果
之前用这方法抽DNA所测出OD约为1.4-1.7
在1200bp上方(也就是分子量>1200bp)有两条band, 下方则是很淡smear的样子.
我的问题
我想请问版上是否有高手用过TRI reagent抽DNA, 并观察其DNA ladder情形呢?
我不晓得是DNA没抽成功呢? 还是每个well放的量太少, 所以看不到ladder的样子呢
麻烦请版上高手为我解惑呀!! 感激不尽! ^^*
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 140.129.77.140
1F：推 K587262:看胶片比较准吧 如果是smear 时间点往前挪 08/09 19:10
2F：→ K587262:还有就是 我会收细胞上清液 08/09 19:11
3F：推 Koilocytosis:谢谢! 我有收上清液, 胶片的话可能要晚点才能上传:) 08/09 19:37
4F：推 skenzo:请问是何种细胞株呢 08/10 09:55
5F：推 Koilocytosis:口腔癌细胞株 OECM-1 08/10 19:35