作者aggaci (徵钢琴老师啦!)
看板Biotech
标题Re: [求救] pET32 vector的使用
时间Tue Aug 7 18:21:24 2007
※ 引述《mournermind (阿蒙)》之铭言:
: 因为实在没什麽头绪想请有经验的各位提供个想法
: 我现在要的蛋白接在pET32b中 想要利用它的trx来增加我蛋白的可溶性
: 表现後的确本来几乎不可溶的蛋白(以前学姐做)变的是有部份可溶了
: 我现在想利用纯化soluable protein的方式来纯化出我要的蛋白
: 再将trx切掉得到较完整的我要的蛋白 但是由於以酵素切掉trx後
: His後所得到的proein带有His tag而被切掉的trx上也带有His tag
: 所以想问有经验的学长姊们遇到这问题可以怎麽做呢?
: 我应该可以如何来将这两个都带有his的蛋白分开来咧@@?
: 真的是很想知道应该怎麽做 有办法的人请给我一些指点 orz
接trx实在没什麽好处
纯化没特别方便、solublize的效果也不好
不如试试看GST或是MBP...
也就没上面纯化的问题
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