作者odones (天空)
看板Biotech
标题[求救] 植物DNA的萃取
时间Thu Jul 19 19:13:33 2007
最近要抽植物的Genomic DNA
可是一直不顺跑电永都是smear的情况
把protocol列出来希望有大大可以给予指教
谢谢
1. CTAB 500贡ul ＋ beta-me 40 ul 预热65℃ 30 min
2. 液态氮研磨植物叶片加入（1）水浴65℃ 2 hr
3. 加入chloroform/isoamyl 24：1 500汹ul，倒转tube 100次，离心8000 rpm 10min
4. 吸取上清液到新tube，加入chloroform/isoamyl 24：1 500 ul，倒转tube 100次，离心8000 rpm 10min，共三次
5. 加入isopropanol 500ul，放至-20℃ overnight
6. 离心8000 rpm 10min，4℃，去上清液晾乾
7. 加入TE buffer 500ul 弹至全溶（tip可切斜口）
8. 加入RNase 5汹ul，37℃ 30min
9. 加入isopropanol 500 ul，放至-20℃ 30min
10. 离心8000 rpm 10min去除上清液
11. 70％酒精wash 2次，晾乾
12. 加入TE buffer 200 ul，测OD，跑电泳
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 140.116.25.148
1F：推 sandyfanss:O.D. 260 280 ratio of 260/280? 07/20 17:12
2F：推 kazzuo:我都是用13,000rpm在离心,4度下10min给你参考 07/22 18:32