作者Nox4156 (智障= =)
看板Biotech
标题[问题]基因出了问题! @@
时间Wed Jul 18 02:01:13 2007
大家好! @@
我有一个cDNA将其尾端以PCR方式加上 His tag
然後再接回原本的expression vector内，但是transfection到动物细胞时表现不出来
後来以Baculovirus expression system表现也没东西
原本是想说会不会是tag没接好~但是定序後又发现都是对的
所以将其切下接到pET系列的Vector时，以IPTG诱导後
以western blotting检示发现有很多bend出现(几乎是ㄧ条抹下来的!)
所以基因本身是没问题的罗?!
所以我现在在怀疑会不会是原本在动物细胞的表现载体上Vector本身出问题?
请大家指教一下! 感恩! @@! 这个基因的表现困扰我好久了= =
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