作者aggaci (徵钢琴老师啦！)
看板Biotech
标题Re: [问题]关於EMSA non-specific binding protein
时间Sat Jul 14 19:20:24 2007
※ 引述《achihla (gg)》之铭言：
: 我的EMSA实验的反应如下
: biotin-labeled probe: 20fmol
: poly(dI。dC)。poly(dI。dC) 1ug
: MgCl2 5mM
: Tris 10mM
: KCl 50mM
: DTT 1mM
: 得到的结果
: 有五个shift band 都无法被竞争掉
: 应该是non-specific binding protein
: 请问大家再做EMSA时，也会有这麽多non-specific binding protein吗?
你的意思是否是说shift无法被自己的cold probe竞争掉？
是否有pre-run...?
我刚做EMSA时没有pre-run就会有这种现象
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◆ From: 140.114.100.165
1F：推 achihla:有的shift可以被竞争掉 但有的不行，可是我也有pre-run 07/16 09:47
2F：→ achihla:pre-run 50V 1hr30min 07/16 09:49
3F：推 aggaci:请问竞争倍数？竞争是哪一种？ 07/16 12:28
4F：推 achihla:我是用specific cold probe 200X去竞争 07/16 19:42
5F：推 aggaci:歹势，我没这种情形，你就针对有被竞争掉的shift去研究吧 07/16 22:35
6F：推 achihla:感谢感谢!! 07/17 22:20