作者aggaci (I tried....)
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标题Re: [问题] 请大家救我的real time PCR...
时间Mon Jul 9 23:38:53 2007
※ 引述《kyokolove (心想事成)》之铭言：
: 我最近做real time PCR
: 当初这个基因我已经用RT-PCR 做过了
: 想说用real time能更准确比较
: 结果 我却跑不出结果 每次都是undetect
: 我一共用了两种primer 一种是用primer3设计
: 一种是RTprimerDB这个网站提供的
: 可是两个网站都呈现出一样的结果--> undetect
: 而且他们的曲线长的很奇怪
: 都是在threshold以下 一直呈现锯齿状而有向上的趋势
: 可是一直到40个cycle前都没有冲过threshold
: 可是我的internal control GAPDH跑的很正常
: 所以排除机器或是材料的问题...
: 再说正常的曲线应该是会突然有暴冲几乎直线通过threshold的感觉巴
: 请问有人有这种经验吗 这样的 曲线 undetect 代表什麽情况呢???
: 请大家帮帮我~~~~~~~ 我已经重做快两个月了 Q ____ Q
: 谢谢大家~~
是否有把QPCR玩的产物拿去跑电泳？
你的产物预期多大？
这很明显应该是没扩增出来...
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◆ From: 140.114.100.165
1F：推 kyokolove:我没有拿去跑电泳耶... 我是设计P 200bp以内的 07/10 00:03
2F：→ kyokolove:请问template量最高可增加到多少阿 我目前是40ng 07/10 00:04
3F：推 aggaci:跑电泳看看 07/10 00:22