作者kyokolove (心想事成)
看板Biotech
标题[问题] 请大家救我的real time PCR...
时间Mon Jul 9 20:47:06 2007
我最近做real time PCR
当初这个基因我已经用RT-PCR 做过了
想说用real time能更准确比较
结果 我却跑不出结果 每次都是undetect
我一共用了两种primer 一种是用primer3设计
一种是RTprimerDB这个网站提供的
可是两个网站都呈现出一样的结果--> undetect
而且他们的曲线长的很奇怪
都是在threshold以下 一直呈现锯齿状而有向上的趋势
可是一直到40个cycle前都没有冲过threshold
可是我的internal control GAPDH跑的很正常
所以排除机器或是材料的问题...
再说正常的曲线应该是会突然有暴冲几乎直线通过threshold的感觉巴
请问有人有这种经验吗 这样的 曲线 undetect 代表什麽情况呢???
请大家帮帮我~~~~~~~ 我已经重做快两个月了 Q ____ Q
谢谢大家~~
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