作者marlboro11 (marlboro)
看板Biotech
标题[问题] 想请问一下关於Tricine SDS PAGE的问题
时间Sat Jun 23 21:38:28 2007
因为目前实验的蛋白质分子量只有7kDa
用Glysine的gel去跑的话 会跑的很糟糕
所以实验室的老师买了Tricine system的药品
现在全部都已经配好了 只是每次跑胶时都有一些小问题
想问问看版上的大大有没有什麽好方法可以解决
1.Separating配的是16.5%的 可是每次用49.5%T,6%C配出来颜色都会变成白色的
这样算是正常吗?(後来尝试过用49.5%T,3%C配Separating 配出来就不会这样
配出来也尝试过跑胶 跑起来也没有什麽不一样的地方 想请问这样的话对於结果
有什麽问题吗?)
2.Stacking配好以後都需要30~45分钟才会凝固 试过APS与Temed的量都增加
但是还是需要大约这些时间(Separating与Spacer都没有这个问题?)
想请问到底是加的量出错 还是原本就需要较久的时间
Stacking加的量如下:
49.5%T,3%C 0.25ml
Gel buffer 0.75ml
Water 2ml
10%APS 12μl
Temed 3μl
想麻烦版上的各位大大帮在下解决这些问题 谢谢<0>
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