作者unkilik (stay by my side..)
看板Biotech
标题Re: [问题] 请问一个flow的问题
时间Mon Jun 18 18:28:04 2007
※ 引述《soom ()》之铭言:
: ※ 引述《unkilik (stay by my side..)》之铭言:
: : 我的实验是用含GFP的病毒去感染细胞
: : 我想看病毒到底有没有进入细胞
: : 跑了Flow之後
: : 是否可以由FSC对SCC的图看出有变化
: : 听学长说如果细胞内的particle比较多
: : 散射也较大 导致SCC往上变化
: : 由我的实验图是可以看出一点点的变化
: : 可是却没有很明显的shift
: : 有人有高见的嘛
: : 我对Flow实在不太懂
: : 还有我想请问一下有类似的paper做相关的研究吗
: 我们家也是用lentivirus感染细胞後跑flow测定病毒的titer
: 相关的研究应该很多才是
: 就算实验图真的可以看的出差异 我猜其实也不怎麽能达到统计上的明显差异吧
: 因为SSC虽然是看细胞的颗粒性没错
: 可是像是GFP这种等级的protein应该是对颗粒性的影响不大
: (没记错的话 FSC-SSC的典型代表图是白血球会分成三群)
: 一个才不到30 kDa的protein如果能被侦测的话
: 那细胞内的其他protein应该会造成很大的杂讯吧
: 像这种没啥统计上明显差异的图 不龟毛的老板还好
: 拿去给我们老板看应该会被削一顿
: 另外我比较好奇的
: 既然你们都跑flow了 用的也是带GFP的病毒
: 那为何不看萤光呢 这样不是会有比较明显的差异吗??
其实我没问的很好
我的问题现在不是萤光有没有表现
因为GFP有没有表现我从Flow或是从萤光显微镜下就可以看出来了
而我的问题是如果病毒的颗粒进入细胞内
那从SSC是否可以看出变化
因为我做的研究是将病毒modification
有种情况下这个病毒不会产生GFP
当他没产生GFP下 我就不知道到底是病毒没进入细胞内
还是病毒进入细胞内儿没表现
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◆ From: 59.121.192.40
1F:推 flyeagle1978:基本上SSC并不是很好的判断方式 06/27 14:34
2F:→ flyeagle1978:建议同时使用western等其它方式 同时侦测病毒较好 06/27 14:35