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标 题Re: [问题] Real-Time的问题(也有PCR的问题)
发信站清华生命科学 BBS (Thu Jun 14 19:42:33 2007)
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> 我有作定性与定量的PCR
> 现在我的问题是以结果显示定性结果有污染 (no-template 有条带)
> 但是定量的 no template 却无侦测到萤光反应 (25 copy 大概 37.x CT)
> 他们共通的部份是Q水 primer 共通使用的平台 微量吸管跟 tip
> 而发现污染後我 reagent 全部换新的
> 仍然在 no template 有条带
> 主要的问题是想问...70~75度酒精能灭除污染源吗?? (DNA跟PCR product)
> 我曾经以稀释的漂白水浸泡微量吸管的头与擦操作平台
> 也将微量吸管的头灭菌过
> 皆没办法根绝污染
> (曾经故意将Q水加入微量PCR产物在灭菌,仍然做的出条带 = =)
> 我的PCR产物大多 70~150 bp...猜测短的产物比较难破坏?
> 没试过酒精不知道效果如何
> 另外,如果 no template 被"未抽取DNA的植物组织"污染
> 不知道做不做的出条带 (想请问您)
你的问题有点复杂
建议你先检查仪器是否正常
仪器本身是否有污染
(跑空的)
尤其是已经使用过一阵子的仪器
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※ Origin: 生命科学 BBS <bbs.life.nthu.edu.tw>
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