作者hhyhuang (hhyhuang)
看板Biotech
标题Re: [求救] 重组蛋白纯化後,分子量改变了
时间Sat May 26 17:15:55 2007
※ 引述《hhyhuang (hhyhuang)》之铭言：
: 最近遇到一个问题,想请教大家:
: 我表现一个24kDa的protein於Ecoli(BL21DE3)
: ,跑PAGE与control比较後,的确可以在约24kDa的位置,
: 看到明显的band被诱导出来,但是,
: 进行His纯化後,结果原本受IPTG诱导的重组protein
: 已经不在24kDa的位置了,跑到37kDa
: 但是,我用抗体又能hybid到37kDa的band,
: 我怀疑会不会我的protein被磷酸化了,有方法可以让我的protein回复成
: 24kDa吗?或者有方法证明我的重组蛋白在37kDa是因为被磷酸化所造成的吗?
: 感激不尽~~
~~~~~谢谢大家的回文~~~~~~~
我的protein是会与膜蛋白(small GTP binding protein)进行交互作用的protein.
如果是其他的作用(如醣化..等PTM),又该做哪些实验证明呢?(越来越感到慌恐了!!)
另外,在sample dye中含有DTT,这样可以算是DTT对sample处理吗?如果算的话,
是不是就不是与dimer有关了呢??
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