因为要分离siRNA(20~23nt),所以配置了15%polyacrylamide gel/7M Urea , 配方如下: http://www.genetics.ucla.edu/labs/fan/Protocols_MicroRNA.htm 40% Acrylamide 18.75 mL 5x TBE Buffer 5 mL dH20 10 mL Urea 21 g 10% APS 400 ul TEMED 40 ul total体积50ml ps: Acrylamide我并没有加bis-acrylamide 铸完後1个小时左右,我去没去跑胶,先拆胶起来看看gel是否有问题 拔玻璃片的时候就不是很好拔了,但用buffer湿润後就可以顺利的把玻璃片拔开, 但是gel却整个都紧紧黏在白色的板上,感觉gel是有凝固, 但是....就是无法把他由白色的板上取出.gel是呈现一种很黏很黏的状态, 用tip去戳它还会牵起丝来.... (￣□￣|||)a 我查了几篇配制gel的文章, 有些Acrylamide会写要加19:1的bis-acrylamide进去,但有些就不会特别着名要加. 而Urea从6M~8M的都有,至於10% APS与TEMED的量则各有个的喜好. 我算了一下这次用的配方,其实并没有超出固定范围内. 可以请教一下有配制过高浓度denaturing polyacrylamide-urea gels的先进们, 我的配方有错误的地方吗?或者铸这种gel最佳的配方大家都用多少比率呢? 先行感谢大家拨亢回答呀 --

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