作者allmerit (ring)
看板Biotech
标题Re: [问题] raw264.7 如何transfect
时间Thu May 24 15:01:47 2007
※ 引述《liuse (充实自己,提昇自己)》之铭言:
: ※ 引述《bluehttp (虾毁)》之铭言:
: : 最近在养这个细胞
: : 真的是快被他搞死了
: : passage时不管是用tryspin或是用刮的
: : 细胞在数时都不多
: : 实在很难把细胞放大作更多的实验
: : 而且这个细胞不管用啥方法
: : transfect效率都超低的
: : 不知各位有啥好的方法可以提供
: : 感激不尽阿
: 这是mouse的macrophage
: 印象中我以前用blue tip冲一冲就可以冲下来啊
: 也没用到trypsin
: 细胞个数的确不会很多
: 趴完还要养个一两天才会满
: 而且很容易走样
: 不能长太满再趴或是养太久
: transfect我以前都是用lipofectamine 2000
: 效率也不是顶好,我看过的paper也都是用这个
我们实验室颇常养的 细胞数都还颇多的耶
用tripsin 处理约一分多钟....用拍的就可以拍下来...(大力点别客气)
会不会是您一开始拿到的细胞株就不大健康呢
若是精神好的RAW应该是圆呼呼的球状 如果状况不好则会有长角的情形发生
trasfect的话 我记得似乎电阻值要够大 穿透时间才能缩短 减少细胞的损伤
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