※ 引述《cytospin (My Ernest)》之铭言： : 各位先进好 : 小妹最近开始想做confocal : 得到的资讯大多是fix细胞的步骤 : 可是我想要做那种看到protein internalization然後被derade掉的 : 所以要做活细胞影像 : 不过有几个问题 想问一下有做过的人 : 我的细胞是suspension cell : 我想看的是cKit (RTK) mutant 他会自动林酸化然後turn over : 加药物之後 cKit会不稳定然後 cKit expression就消失了(on western) : 想请问一下 1. 活细胞影像的fix 还有打洞 使用的Material ?? : 如果是fix的细胞 是4% paraformadehye + 0.5% Triton X100 : 活细胞要用啥ㄌㄟ ?? 又不会弄死细胞又可以intracellular stain的 : 2. 如果我有抗体bind cKit -->会不会影响他internalization?? : 我不清楚我的抗体会部会block cKit function yet... : 先这样..感恩....请各位先进给点意见 living cell一定要长在dish 或 plate里， 所以只能用倒立显微镜看，所以除非你们的confocal是倒立显微镜。 而你若要看细胞内的整个过程，还要在搭配上time-lapse的相关设备。 至於你的实验，可能可以在不同的时间点固定细胞， 再去用confocal仔细观察。 --

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