作者polestar (...)
看板Biotech
标题想请教各位大大蛋白质表现的问题^^
时间Tue May 22 16:51:29 2007
各位大大请问一下 我的蛋白质大小约85kD 在N端还带有一小段的signal peptide
但是它是胞内的蛋白质
目前已经试过不同温度(37~25度) 不同IPTG浓度(0.01mM~1mM)来表现
也利用在蛋白质N端加上不同的fusion protein(GST,Trx,NusA)希望增加溶解度
并且同时用了E.coli BL21(DE3)和 JM109(DE3)来做为表现的host
但是表现出来的蛋白质几乎都是inclusion body
不知道还有没有办法去改善这个问题呢 希望能拿到soluble form的蛋白质
利用inclusion body来做refolding是最後的打算了> <
谢谢^^
--
承担.....流浪
留下.....
离开
每天的每天...
--
※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 140.112.78.30
1F：→ polestar:更正 温度试过(37~15度) 05/22 16:53
2F：推 liuse:我觉得太大了耶... 85KDa 还加fusion 05/22 17:59
3F：推 chiehgriffin:您的蛋白质有很多双硫键吗. 如果有可以换不同的菌 05/22 21:08
4F：推 b46006:细菌的蛋白质也有双硫键吗? 05/23 19:06