作者yiw (开始)
看板Biotech
标题[问题]请问CHIP
时间Mon May 21 19:13:04 2007
请教版上曾经做过CHIP的高手
做了好久的CHIP最後在PCR阶段遇到了困难
input有出现band但是非常微弱
其他IP下的DNA根本就没有讯号
参考paper利用RNA Pol II当positive control
但是也P不到东西
後来觉得可能是DNA品质不好所以测了OD 260/280
发现只要是IP下来的DNA ratio都非常低 大概只有1.0左右
input比较好大概1.5左右
我是利用phenol/chloroform/isoamyl alcohol做DNA纯化
每次都很小心不要取到有机层
但是出来的ratio还是很差
请问是不是因为DNA品质的关系所以PCR跑不出来？
如果是的话有哪个步骤要小心才能使DNA ratio提高呢？
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