小弟用Phenol/Chloroform纯化DNA有一阵子了 我先说我的实验方式 将restriction enzyme作用过的30 ug DNA沉淀去盐 再用proteinase K (100–200 ug/mL)及0.5% SDS 以50 ul体积在50度C下作用30分钟 做用完後补水到200 ul 加入同体积的Phenol/Chloroform vortex 30s 静置3 min 之後离心13000 g 4度C 15分钟 离心後会有透明的水层跟黄色的有机层中间白白的是蛋白质 因为之後的实验需要通常我都会做个两三次去掉蛋白质那一层(就看不见白白的) 问题来了 刚离完心是透明的水层 会有微小泡泡从中间飘上来 感觉就像起雾一样 但是将水层transfer到新的tube这样的现象就会不见了 以前都没有这样情况过年後才有的 但是我之後的实验也就做不出来了 XD 这个DNA我之後是要做 in vitro transcription的 以往的产量都很多 但是最近都做不出来 有神人可以帮帮小弟我吗 感激不尽 --

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