作者Mouseking (叫我老鼠王....-_-)
看板Biotech
标题Re: [求救] 诱导表现蛋白质
时间Tue May 8 18:43:26 2007
※ 引述《Talen (找到答案了~)》之铭言：
: ※ 引述《u8524009 (VIP好人卡....)》之铭言：
: : 要先问一下你所谓的破菌後蛋白质少很多..是你用那一个fraction去跑胶得到的结果
: : 不晓得你有没有测过你的目标蛋白质是soluble form还是inclusion body?
: : 假设你的蛋白质是inclusion body,而你取上清液去跑胶;
: : 亦或是你的蛋白质是soluble form,而你取离心後不溶的pellete去跑胶
: : 都会得你像你所说的破菌後,蛋白质减少很多的现象
: 谢谢你的回应～^^
: supernatant 和 pellet 部分都有做
: 我有用anti-his侦测我的目标蛋白是在 supernatant
: 破菌後取固定菌数 loading 跑 SDS-PAGE 发现我的目标蛋白相对量减少很多
: 目前我在怀疑我的蛋白会不会被 degrade
: 是否可以加入类似PMSF的protease inhibitor来操作实验呢？？
我最近也在做这实验....但很不顺利
请问你的protocol可以分享吗？
我也会定期和你讨论我的结果...谢谢
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◆ From: 123.192.206.98
1F：→ Talen:当然可以 不过操作过程有点复杂 我整理好在跟你说 05/09 09:41