作者cytospin (My Ernest)
看板Biotech
标题[问题] live cell image??
时间Sat May 5 04:27:03 2007
各位先进好
小妹最近开始想做confocal
得到的资讯大多是fix细胞的步骤
可是我想要做那种看到protein internalization然後被derade掉的
所以要做活细胞影像
不过有几个问题 想问一下有做过的人
我的细胞是suspension cell
我想看的是cKit (RTK) mutant 他会自动林酸化然後turn over
加药物之後 cKit会不稳定然後 cKit expression就消失了(on western)
想请问一下 1. 活细胞影像的fix 还有打洞 使用的Material ??
如果是fix的细胞 是4% paraformadehye + 0.5% Triton X100
活细胞要用啥ㄌㄟ ?? 又不会弄死细胞又可以intracellular stain的
2. 如果我有抗体bind cKit -->会不会影响他internalization??
我不清楚我的抗体会部会block cKit function yet...
先这样..感恩....请各位先进给点意见
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1F：→ stemcell:没听过 fix 再用detergent处理过後的细胞 还是活的... 05/05 10:55
2F：→ stemcell:你要不要先去了解其他人live cell image怎麽做的 05/05 10:56
3F：推 stemcell:一般都是注射或是使细胞表现有萤光tag的蛋白 05/05 10:58