作者ppta (幸福的瞬间)
看板Biotech
标题Re: [问题] 限制霉实验的问题...........
时间Thu May 3 08:20:24 2007
※ 引述《Highwind (小羊回来了)》之铭言:
: ※ 引述《ppta (幸福的瞬间)》之铭言:
: : 请问一下,我看学长之前的论文,做限制脢实验,加的各试剂的量有分PCR产物强跟PCR产
: : 物弱,请问一般大家在实验的时候,是怎麽先知道PCR产物强弱的?另外,PCR产物等要
: : 加多少怎麽决定?而限制脢加多少怎麽决定?要反应多久怎麽决定?
: : 是不是PCR产物、限制脢量、反应时间有一个比例关系,而且跟限制脢的单位切割长度有
: : 关?那要怎麽算出这些量呢?
: 理论是理论,但端看种类而定,不同厂牌影响也很大,新旧也有关
有理论吗?能教一下吗?因为我实在是菜鸟。
: : 再问一下,限制脢是不是可以切久(比方超过一个理想时间),但是不能够切不足时间。
: : 所以时间的话,愈久没关系。
: 你切的目的是要做什麽
: RFLP?construct?
我做的基因都是别人做过的基因了,我要用RFLP的方式来确认研究对象的型别。
: : 学长现在出国了,所以没办法问学长,而且我做的基因位置跟他不一样,请求各位高手帮
: : 忙,谢谢
: 就试呀!实验就是试了失败,想一想又试
: 不知道时间就固定unit做time-dependent
: 如果效果不彰看要不要加BSA
我拆了其中一个看,我看里面就有加BSA耶,我以为需不需要BSA,它自己会调好不是?
: 不确定位置就load一个不切
: 如果觉得怪就去要一个plasmid来做对照
: 另外PCR强弱是能最佳化的
前三句看不大懂耶......只是要看型别也要做前三句的测试吗?
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◆ From: 203.71.2.194