作者Highwind (小羊回来了)
看板Biotech
标题Re: [问题] 限制霉实验的问题...........
时间Wed May 2 23:48:44 2007
※ 引述《ppta (幸福的瞬间)》之铭言:
: 请问一下,我看学长之前的论文,做限制脢实验,加的各试剂的量有分PCR产物强跟PCR产
: 物弱,请问一般大家在实验的时候,是怎麽先知道PCR产物强弱的?另外,PCR产物等要
: 加多少怎麽决定?而限制脢加多少怎麽决定?要反应多久怎麽决定?
: 是不是PCR产物、限制脢量、反应时间有一个比例关系,而且跟限制脢的单位切割长度有
: 关?那要怎麽算出这些量呢?
理论是理论,但端看种类而定,不同厂牌影响也很大,新旧也有关
: 再问一下,限制脢是不是可以切久(比方超过一个理想时间),但是不能够切不足时间。
: 所以时间的话,愈久没关系。
你切的目的是要做什麽
RFLP?construct?
: 学长现在出国了,所以没办法问学长,而且我做的基因位置跟他不一样,请求各位高手帮
: 忙,谢谢
就试呀!实验就是试了失败,想一想又试
不知道时间就固定unit做time-dependent
如果效果不彰看要不要加BSA
不确定位置就load一个不切
如果觉得怪就去要一个plasmid来做对照
另外PCR强弱是能最佳化的
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◆ From: 221.120.41.216