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标 题Re: [问题] PCR跑出来都是smear
发信站批踢踢参 (Wed Apr 18 17:37:03 2007)
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※ 引述《[email protected] (e04)》之铭言：
: 最近在用inverse PCR夹ㄧ段未知序列
: 可是出来的东西都是smear
: 我调整过tm值 template浓度 cycle数
: 用不同厂牌的taq
: 加formamide (有可能是GC-rich 但实际是不是并不清楚)
: 但是结果都一样
: 请问这样应该怎麽办?
会不会是 ligation 的时候就出问题了?
建议尽量用低浓度的 DNA
template 也是尽量低浓度
另外可以尝试的是把第一次 PCR 的产物稀释一下当 template 再做第二次 PCR
(如果有另一组 primer 更好)
不知道有没有 positive control 确定这个系统可以成功?
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