作者yusky (鱼)
看板Biotech
标题Re: [求救] 有人用过 invitrogen的c400吗? 测 ROS的
时间Fri Apr 13 22:57:05 2007
※ 引述《phoneta (蜂起)》之铭言:
: 我买了要拿来测 ROS的 c400
: 但他完全没给说明书 不知道要从何下手
: 有没有好心人 实验室有用过这各东西的 可以给予指导?
: 我的实验大概是 将细胞种在10cm 0r 6cm dish 加药後
: 要看时间点0 .3 . 6 .9 .12. 24 hr ROS产生的量
: 会用flow cytometry的方法测量 不是用显微镜看
: 我不知道要在何时加入C400 希望有用过的人教一下 很急 谢谢^^
我实验室使用的是C369及C6827
基本上也是测ROS的
所以我想应该是都一样
在做完时间点後要做flow之前才加的
(通常就是往前推时间,要加染剂之前几小时加药,把所有时间点都做在一起
这样要染也比较方便)
我用的细胞是会贴的
所以我是先加染剂於37度反应三十分後
在吸掉染剂,加入trypsin让细胞掉下来
用medium收集细胞後离心
加入buffer放冰上然後就去上机了
另外~~要避光喔
至於染剂的浓度的话~~就会因为各种细胞不同了
还有就是一般是用DMSO或100%ethanol溶染剂(先配成stock)
因为这两种都会对细胞有影响~~所以最後加入的量最好在1%以下
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◆ From: 163.25.118.160
1F:推 phoneta:非常感激你呢 谢谢^^ 04/15 13:40