作者amnesiachick (;l;l)
看板Biotech
标题Re: [求救] 关於Cy5的发光机制
时间Fri Apr 13 15:40:56 2007
我是第一次来这个板发问的原po 看到好多人回答我的问题我好感动喔T.T
虽然书报已经结束了 但是看一看大家的回文还是有帮忙到^^
从JACS (2005) 127:3801-3806这篇reference里面 大概就跟n大讲的差不多
好像就是扯到singlet, triplet之类的(量物没学好 看不懂XD)
再问个小问题 我以为目前除了Cy5以外有别的萤光分子是有photoswitchable的特性
(因为paper里面说 其他有photoswitchable的萤光分子应该也可以用这个技术)
但是n大说只有Cy5才有??请问有人有听过其他萤光分子有此种特性的吗?
btw 今天果然就被问到在分子结构上能否解释此特性...囧
※ 引述《nightcatman (夜猫)》之铭言:
: 试着解释一下,有错请指正
: Cy5受红光激发之後,如果再持续照射,那麽在photobleaching
: 之後会形成radical-electron 或是 radical-hole pair
: 这就是该paper里所称的dark state (请注意这并非原来的original state)
: 而如果再对处於dark state的Cy5照射大约300-532nm的光
: 并且加上一个electron/hole donor (也就是Cy3在此扮演的角色)
: 就可以让Cy5重新被激发到fluorescent state
: (所以如果Cy3距离Cy5太远,doner效果就不好,Cy5就不容易被重新激发)
: 这称之为Cy5的reversible optical switch特性
: 要厘清的一点是
: 这个特性底层的原理是photoinduced electron transfer (PET)
: 而不是FRET
: PET的有效作用距离比FRET更短, 两者的kinetics pattern也不一样
: 最後补充一点
: 目前只知道Cy5有这样的特性
: 但是对於此特性在分子结构上的形成原理还没有定论
: Reference: JACS (2005) 127:3801-3806
: ※ 引述《amnesiachick (;l;l)》之铭言:
: : 有几个跟Cy5有关的问题 希望知道的人能够给点指点^^
: : Red laser light that produces fluorescent emission from Cy5 can also
: : switch the dye to a stable dark state. Exposure to green laser light
: : converts Cy5 back to the fluorescent state, but the recovery rate
: : depends critically on the close proximity of a secondary dye, Cy3.
: : 主要是有关这一段的问题.在看到这篇paper以前我认知中的Cy5是照红光就会亮,
: : 然後就一直亮到它photobleach为止.所以我看不懂为什麽red laser会
: : "switch the dye to a stable dark state".而且这里green laser的存在目的是什麽呢?
: : 如果不照green laser, 一直照red laser, Cy5就不会再亮了吗?
: : "green laser light converts Cy5 back to the fluorescent state",
: : fluorescent state不是指excited state吗?可是在paper里面照绿光的
: : 时候是没有emission的. 这几部分我真的很疑惑.
: : 另外请问Cy3跟Cy5之间的距离会影响recovery state的问题,这应该从哪个角度去解释呢?
: : 因为我查相关资料,里面也只是提到这个现象,但并没有详细解释为什麽?
: : 拜托大家了^^
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◆ From: 123.195.33.136
1F:推 nightcatman:不...我不是说"只"有Cy5才有...而是Cy5"具"有此特性.. 04/13 18:43
2F:→ nightcatman:可能是我中文能力退化了... Orz 04/13 18:45
3F:推 nightcatman:我已经把容易造成误解的那句改掉了 04/13 18:49
4F:推 amnesiachick:囧 看懂那句中文了XD 我没看好sorry~ 04/13 19:07